抗體的不正確管理和儲存可能對其性能產(chǎn)生重大影響。本文討論了一些存儲和使用抗體的最佳實(shí)踐，以便在您的實(shí)驗(yàn)中充分利用它們。

太熱而無法處理？

在儲存抗體時，您應(yīng)始終參考產(chǎn)品特定數(shù)據(jù)表并遵循制造商的說明，因?yàn)槿魏慰贵w都必須在正確的溫度下儲存。不這樣做可能會導(dǎo)致性能下降并使任何制造商的保證失效。不同溫度下的穩(wěn)定性很大程度上取決于抗體的形式和配方。 

抗體也可能有多個推薦的儲存溫度，具體取決于您希望儲存的時間長度。例如，我們大多數(shù)抗體的標(biāo)簽和數(shù)據(jù)表都將“+4oC 或 -20 oC（如果首選）”作為推薦的儲存條件。這是因?yàn)榇蠖鄶?shù)抗體可以在 +4oC 下保存很短的時間，通常是幾周，但應(yīng)該在 -20oC 下長期保存。

提供的凍干抗體在凍干時和復(fù)溶后可能有不同的推薦儲存條件。如果您使用的是凍干抗體，請查看數(shù)據(jù)表，了解重構(gòu)前后推薦的儲存條件。

一些抗體只有一種推薦的儲存溫度。例如，不含任何抗微生物劑（如疊氮化鈉或硫柳汞）的抗體只能冷凍（通常為 -70oC 或更低）儲存，以減少微生物生長的可能性。  

血清和腹水應(yīng)冷凍保存，因?yàn)樗鼈兒锌梢越到獾鞍踪|(zhì)（包括抗體）的蛋白酶。冷凍儲存有助于最大限度地降低蛋白酶活性并防止抗體在儲存過程中降解。

相反，酶偶聯(lián)抗體，例如 HRP 偶聯(lián)抗體，通常不應(yīng)冷凍。冷凍和解凍這些抗體會降低酶的催化活性，從而在與底物一起孵育時導(dǎo)致信號減弱。

分而治之

與冷凍和解凍相關(guān)的溫度波動會導(dǎo)致抗體變性和聚集，從而削弱其與其靶標(biāo)結(jié)合的能力。為了減少凍融循環(huán)的次數(shù)，應(yīng)按照制造商的說明對抗體進(jìn)行分裝和儲存。此外，抗體應(yīng)始終儲存在低溫冰箱或冰柜的后部，因?yàn)榕c前部或門相比，該區(qū)域受溫度波動的影響較小。您還應(yīng)該避免將等分試樣存放在無霜冰箱中，因?yàn)樗鼈儠?jīng)歷溫度波動的循環(huán)，以避免結(jié)冰。

理想情況下，每個等分試樣應(yīng)包含實(shí)驗(yàn)中使用的抗體體積，因此不需要重新冷凍。但是，小體積對濃度波動和蒸發(fā)更敏感，因此建議體積至少應(yīng)為 10 μl。

當(dāng)以高濃度儲存時，抗體不太可能降解或與血管壁結(jié)合。因此，不建議在分裝前稀釋抗體。

當(dāng)?shù)确峙c熒光團(tuán)或酶結(jié)合的抗體時，保護(hù)它們免受光照很重要。暴露在光線下可能會導(dǎo)致熒光團(tuán)光漂白或破壞與抗體結(jié)合的酶的結(jié)構(gòu)。這將阻礙抗體產(chǎn)生信號的能力。

保持干凈

重要的是不要讓任何可能降低其性能的物質(zhì)污染您的抗體。為避免污染抗體，最好在無菌條件下移取抗體并分裝抗體——以減少從同一管中移取的次數(shù)。

只取你需要的東西

解凍抗體時，只取出實(shí)驗(yàn)所需數(shù)量的等分試樣，然后在冰上緩慢解凍。溫度的劇烈波動，例如加熱您手中的小瓶，可能會導(dǎo)致抗體不穩(wěn)定。

如果您需要為同一實(shí)驗(yàn)解凍多個等分試樣，請確保使用經(jīng)過相同數(shù)量凍融循環(huán)的等分試樣，并將所有等分試樣的內(nèi)容物匯集在一起，以確保您使用的是均質(zhì)的抗體溶液。

在可能的情況下，避免重新冷凍已解凍的抗體也很重要。額外的凍融循環(huán)可能會損壞抗體的構(gòu)象并降低其與其靶標(biāo)結(jié)合的能力。如果您確實(shí)發(fā)現(xiàn)您為實(shí)驗(yàn)解凍的等分試樣中殘留了抗體，如果要在接下來的幾周內(nèi)使用，最好將它們保存在冰箱中，或者丟棄它們。

解凍

最后，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時，將所有抗體保存在冰箱或冰上解凍，直到準(zhǔn)備好使用它們，這一點(diǎn)很重要。這有助于保持抗體的構(gòu)象和抗體與其靶標(biāo)結(jié)合的能力。

我們希望通過遵循這些簡單的提示，您將能夠充分利用您在檢測中使用的任何抗體。與往常一樣，我們祝愿您的研究一切順利。